C1 Complex

上海起發(fā)為complementtech一級經(jīng)銷商，Complement Technology，Inc.于2005年成立.CompTech于2005年收購Advanced Research Technologies。Complement Technology繼續(xù)為世界各地的科學家提供高質(zhì)量的試劑，并在我們的清單中增加了許多新試劑。我們盡力為您的應用提供宜試劑和使用我們補充試劑的宜建議。

名稱： C1 Complex（PURE）                      

目錄號：     A098

可供選擇的尺寸：         200微克C1 1.0毫升

濃度：          > 0.20 mg C1 / mL（見實際濃度分析證書）

形式：                         冷凍液體

活動：                     > 250,000C1H50單位/毫克總蛋白質(zhì)

純度：                        SDS頁面> 95％

緩沖液：                       50mM乙酸鈉，50mM EACA，10mM 芐脒，

                                    10mM，EDTA，300mM NaCl，40％甘油，pH 5.5

滅絕科夫。       阿_280 納米=  1.0毫克0.89 / mL的純C1

分子量：   766,000Da（22鏈）

防腐劑：             無，0.22μm過濾。

存儲：                     -70 ^Ò C或以下。  避免凍結/解凍。

資源：                       正常 人血清（通過認證測試顯示為陰性

對于 HBsAg，HTLV-I / II，STS以及針對HCV，HIV-1和HIV-II的抗體）。

預防措施：              使用正常的預防措施處理人體血液制品。

產(chǎn)地：                       制造在美國。

一般描述

            C1是級聯(lián)中的個補體成分，被稱為補體的經(jīng)典途徑。  C1與抗原結合的抗體（免疫復合物）結合并被其激活，產(chǎn)生啟動級聯(lián)的蛋白酶。  C1實際上是一種以鈣依賴性復合物結合在一起的三種不同蛋白質(zhì)（C1q，C1r和C1s）的非共價復合物。 C1q通過其六個臂中的兩個或更多個結合到IgG或IgM的Fc結構域。  認為多臂與免疫復合物的結合引起應激，這導致復合物中的兩種C1r蛋白（蛋白酶酶原）自我激活自身產(chǎn)生兩種活性C1r絲氨酸蛋白酶（Morikis，D。和Lambris，JD（2005）） 。  這些激活的C1r亞基切割并激活復合物中的兩種C1s蛋白酶酶原。 活化的C1s裂解補體組分C4釋放C4a并引發(fā)C4b與活化表面的共價連接。  活化的C1s也裂解C2并且C2的較大片段與表面連接的C4b結合形成C4b ，C2a，其是經(jīng)典途徑的C3 / C5轉化酶。

物理特性和結構

            C1是由一個C1q分子（410,000道爾頓），兩個C1r分子（92,000道爾頓）和兩個C1s分子（86,000道爾頓）組成的高分子量復合物（766,000道爾頓）。  C1q，C1r和C1s的復合物在存在鈣的情況下是穩(wěn)定的，但如果鈣被去除則易于解離。  C1q本身由18條多肽鏈組成，每條鏈有三條不同的鏈。  當C1被激活時，由于蛋白水解活化，C1r和C1s亞基各自被切割成兩個鏈分子。  因此，C1的SDS凝膠圖案非常復雜。

            C1很難從血清中的其他高分子量復合物中分離出來，廣泛的處理導致自發(fā)活化（Dodds，AW和Sim，RB（1997））。  因此，CompTech出售的C1不是純蛋白質(zhì)。然而，我們近成功地進行了C1的純制備（從Lot＃17開始）。  

功能       

            C1可用于通過將C1與EA孵育來制備在其表面上具有活性C1的細胞（Dodds，AW和Sim，RB編輯（1997）; Morgan，BP編輯（2000））。  EA是綿羊紅細胞，其表面結合有兔抗IgM抗綿羊紅細胞抗體（CompTech＃B200）。  這些細胞（EAC1細胞）可以用SGVB ⁺⁺緩沖液洗滌（見下面的分析），并且如果洗滌不太多或者太長時間，它們保持結合的活性C1。  EAC14細胞可以通過添加C4從EAC1制備，隨后可以通過添加C2來制備EAC142細胞。  類似地，EAC1細胞可用于測定C4或C2（Morgan，BP編輯（2000））。

測定

            經(jīng)典途徑活性單位是CH50，旁路途徑活性單位是APH50。  類似地，用于定量C1活性的單位是C1H50。  甲C1H50單元是需要的功能C1的量以裂解3×10的50％⁷ EA（CompTech＃B200））時C1的量與1個微克C4和0.2微克C2溫育12分鐘，在30 ^Ô在C 500μLSGVB的總體積⁺⁺，隨后加入1mL的豚鼠血清（GPS）的1:50稀釋GVB ^ö 含有40毫摩爾EDTA pH7.2的30分鐘，在37 ^ö C.   SGVB ⁺⁺緩沖液是低離子強度的，含有170 mM的蔗糖，0.1％明膠，5mM的sodium barbital，57毫米的NaCl，0.15毫米氯化鈣稍微高滲的緩沖器₂，0.5毫摩爾MgCl ₂，和0.02％的鈉的疊氮化物。 

規(guī)則

            活化的C1被C1-INH（C1酯酶抑制劑，CompTech＃A140）迅速失活。在血清或血漿中，C1的自發(fā)活化通過存在C1-INH而被小化，C1-INH迅速使自發(fā)活化的C1r和C1s失活。該機制被認為涉及在血漿中存在C1-INH與原生C1之間的弱復合物。這種關聯(lián)顯然穩(wěn)定了C1，因此阻止了自發(fā)激活（Ziccardi，RJ（1982））。在純化期間從C1分離C1-INH是分離的C1不穩(wěn)定并易于自發(fā)活化的原因之一。        

遺傳學

            EMBL / Genbank cDNA登錄號為：C1q鏈（P02745），C1q B鏈（P02746），C1q鏈（P02747），C1r（M14058和C1s（J04080）。C1q   鏈A，B和C的基因都位于染色體1p上，順序為ACB，  C1r和C1s基因緊密連鎖，位于染色體12p上。

不足之處

            已經(jīng)發(fā)現(xiàn)C1的三個組分中的每一個的缺陷（Ross，GD（1986））。  缺乏C1q的患者通常會有免疫復合物介導的腎臟疾病和皮膚損傷。  像缺乏早期經(jīng)典途徑成分的所有患者C1q缺陷個體易患系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）。  它們?nèi)狈?jīng)典途徑功能，可能會或可能不會在血液中表現(xiàn)C1q抗原。  C1r和C1s缺陷患者同樣可能患有SLE和復發(fā)性化膿性感染（Rother，K。等（1998））。

疾病

            請參閱上面的標題為“缺陷”部分。

注意事項/毒性/危險

            這種蛋白質(zhì)是從人血清中純化出來的，因此必須使用適合于處理任何血液衍生產(chǎn)品的預防措施，即使來源通過認證測試顯示HBsAg，HTLV-I / II，STS陰性和抗HCV抗體， HIV-1和HIV-II。

參考

Dodds，AW和Sim，RB編輯（1997年）補充。實用方法（ISBN 019963539）牛津 大學 按， 牛津。

摩根，BP編輯。（2000）補充方法和協(xié)議。  （ISBN 0-89603-654-5）Humana Press，Inc.，Totowa，New Jersey。

Morikis，D.和Lambris，JD編輯。（2005）補體系統(tǒng)的結構生物學。（ISBN 0-8247-2540-9）Taylor＆Francis Group，F(xiàn)lorida。

羅斯，GD（1986）補體系統(tǒng)的免疫生物學。（ISBN 0-12-5976402）學術出版社，奧蘭多。

羅瑟，K.，直到，GO，和H?nsch，GM（1998）的 補體系統(tǒng)。（ISBN 3-540-61894-5）Springer -Verlag，Heidelberg。

Ziccardi，RJ（1982）通過分子內(nèi)自動催化機制自發(fā)活化人補體（C1）的個組分。  J. Immunol。128：2500至2504年。

Ziccardi，RJ。（1982）阿用于穩(wěn)態(tài)C-1抑制劑的新角色：人補體的成分的激活的控制。J. Immunol。128：2505-2508。

僅供研究使用。

不適用于人類或藥物使用。

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