adarbiotech 1031-5說明書

成立于2006年3月的Adar Biotech是下一代醫(yī)療技術的開發(fā)商。該公司開發(fā)了用于增強藥物輸送的微型醫(yī)療設備，并開發(fā)了另一種具有國土安全/生物應用的醫(yī)療設備。該公司還向研究團體提供產品和服務。Adar Biotech生產功能性樹脂和重組蛋白，并為客戶提供免疫學和細胞培養(yǎng)服務。

Adar Biotech的研究服務包括：定制肽合成。單克隆和多克隆抗體的發(fā)展。生物測定開發(fā)服務：ELISA，快速測試，基于熒光和HTS兼容的測定。熒光團和其他標記物與蛋白質的自定義綴合?；蚩寺『突虮磉_。蛋白質純化和折疊。交鑰匙研發(fā)項目服務。

adarbiotech 1031-5說明書

在免疫沉淀（IP）應用中，ADAR適用于結合抗原兔抗體的快速沉淀。

防兔珠子1031-5/10/25

免疫沉淀珠

介紹

利用從正常兔血清中分離的igg，在兔igg親和柱上親和純化山羊抗兔igg（全分子）。洗脫后的抗體通過蛋白g柱進一步純化，以便從其他種類的抗體中分離出igg。純化的抗體用targetlock與sepharose珠偶聯(lián)

化學。

抗兔珠子規(guī)范

基質：sepharosetm cl-4b

耦合方式：TargetLock。

偶聯(lián)密度：0.7-1.2mg/ml羊抗兔igg

兔IgG結合能力：小0.6 mg/ml珠子

平均粒徑：40-165微米

允許的pH值范圍：3.0-11.0

珠狀結構：高度交聯(lián)的球形瓊脂糖，4%

大背壓：0.3Mpa，3bar

大流速：4ml/min/cm~2

建議流速：1-3ml/min/cm~2

儲存：4°C，PBS，pH 7.4，0.3N NaCl，添加01%（w/v）疊氮化物作為防腐劑。

方案：用抗兔珠親和純化免疫球蛋白

A.所需緩沖器

結合緩沖液（1L）：磷酸鹽緩沖鹽（PBS），pH值7.4

中和緩沖液（50ml）：Tris 1M pH 8.0，用1M HCl調節(jié)pH至8.0。

洗滌緩沖液（200毫升）：PBS pH 7.4可選PBS加1%Triton X-100。

洗脫緩沖液（100ml）：0.1m甘氨酸緩沖液，用1N HCl調節(jié)pH至2.8。

再生緩沖液（100ml）：0.1m甘氨酸緩沖液，用1N HCl調節(jié)pH至2.4。

儲存緩沖液：含0.1% sodium azide的PBS作為防腐劑。

B.樣品制備

備注：在0oC至4oC下工作，以盡可能減少抗體降解。

1。如果血清是來源，用4℃的結合緩沖液稀釋5ml至15ml終體積。

2.將稀釋后的血清上清液在4℃下以10000xg離心15分鐘至沉淀碎片。

3。通過0.45μm過濾器過濾上清液。

c.柱親和純化

備注：通常5毫升的床容量用于從0.5升含有單克隆抗體的培養(yǎng)物或50毫升

X10稀釋血清。

一。用30ml結合緩沖液在50ml錐形管中洗滌蛋白抗兔珠子三次。

每次讓珠子自然沉淀5分鐘，用移液管移走上部液相。

2.用清洗過的珠子將珠子倒入空的柱子中，將直徑為1-1.5厘米的柱子包裝起來。柱制備后，用5-10個柱體積洗滌，使柱與結合緩沖液平衡。建議流速為1-2 ml/min/cm~2

是的。

三。將樣品置于室溫。使用注射器或泵，以0.2 ml/min至0.5 ml/min的速率將樣品應用于色譜柱。在大多數情況下，所用樣品的總體積并不重要。保存流經部分以進行SDS-PAGE分析。

四。用20列容量的洗滌緩沖液洗滌。

5個。制備帶有5%v/v中和緩沖液的標記微乳管。把管子放在冰桶上

6.用洗脫緩沖液以1-2ml/min/cm~2的流速洗脫到標記的微乳管中

是的。

免疫球蛋白的洗脫通常需要兩到四個柱體積。當對洗脫部分中的目標蛋白進行定量時，使用洗脫緩沖液作為空白。

d.再平衡、再生和儲存

一。用再生緩沖區(qū)的10個列卷重新生成列?？焖俟ぷ鳎驗樯V柱的ph值應保持在2.4的低水平。

2.在洗脫步驟結束時，立即用10床體積的結合緩沖液清洗柱。

三。儲存條件：將色譜柱儲存在有儲存緩沖液的冰箱中。