上海起發(fā)goldbio I2481C說明書

IPTG 是一種半乳糖類似物，它是不可代謝的，它使 lac 阻遏物失活以誘導(dǎo)大腸桿菌中 β-半乳糖苷酶的合成. 受 lac 操縱子控制的克隆基因的表達是由 IPTG 誘導(dǎo)的。IPTG 常用于誘導(dǎo)重組蛋白，是硫代半乳糖苷轉(zhuǎn)乙酰酶的底物，據(jù)報道可在細菌中誘導(dǎo)青霉素酶。IPTG 常用于需要誘導(dǎo) β-半乳糖苷酶的克隆程序，最常與 X-Gal 一起用于藍/白菌落篩選。GoldBio 是市場上*成本效益的 IPTG，不會犧牲質(zhì)量或純度。Gold Biotechnology IPTG 是經(jīng)過驗證和發(fā)布的™，是一種更好的方式來生成您需要的實驗結(jié)果，

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IPTG如何誘導(dǎo)lac操縱子？

IPTG 類似于乳糖代謝物異乳糖，通過與 lac 阻遏物結(jié)合來誘導(dǎo) lac 操縱子。一旦 IPTG 與 lac 阻遏物結(jié)合，就會發(fā)生構(gòu)象變化，導(dǎo)致 lac 阻遏物與 lac 啟動子分離。一旦 lac 阻遏物解離，RNA 聚合酶與啟動子結(jié)合以啟動表達。

應(yīng)使用多少 IPTG 進行表達/應(yīng)使用什么濃度的 IPTG 進行表達？

大多數(shù)論文建議使用 0.1mM – 1.0 mM IPTG 進行表達。但是，您應(yīng)該使用的量取決于您的蛋白質(zhì)。但是，最好在 0.01mM – 1.0mM 范圍內(nèi)運行 IPTG 滴定，并使用 SDS-PAGE 進行比較以確定最佳濃度。需要記住的是，較高濃度的 IPTG 會導(dǎo)致包涵體。

你如何溶解IPTG？

IPTG 可以溶解在無菌水中。

制作新鮮的 100mM IPTG 原液：

• 重 0.238 克 IPTG

• 加入 10 ml 無菌 H2O。*溶解。

• 預(yù)潤濕 0.22 µm 注射器過濾器，吸取 5-10 ml 無菌 H2O 并棄水。

• 通過準備好的 0.22 µm 注射器過濾器對 IPTG 庫存進行消毒。

• 以 1 ml 等分試樣在 -20°C 下儲存長達 1 年。

您如何存儲 IPTG？

在 -20°C 下儲存干燥的粉末 IPTG。避光。對于 IPTG 儲備溶液，在 -20°C 下以 1 ml 等分試樣儲存長達 1 年。

IPTG有什么用途？

IPTG 的主要應(yīng)用包括：

• 誘導(dǎo)蛋白

• 使用X-Gal進行藍白色篩選